一、核心檢測流程與操作規范  

樣品采集與前處理  

代表性采樣：從糧食、飼料、乳制品等不同部位采集300-500g樣品，粉碎至90%通過20目篩，混合均勻后密封保存于4℃環境，避免真菌過度生長或毒素降解。  

提取與凈化：采用50%乙醇或乙腈水溶液振蕩提取3分鐘，離心后取上清液；通過固相萃?。⊿PE）、免疫親和層析（IAC）或QuEChERS法凈化，去除脂肪、蛋白質等干擾物質。例如，黃曲霉毒素B1檢測中，免疫親和柱可特異性捕獲毒素，提高純度。  

稀釋與復溶：凈化后樣品經氮吹濃縮，用流動相精確復溶至1mL，確保體積誤差≤0.05mL，避免結果偏差。  

真菌毒素檢測方法選擇與技術參數  

傳統方法：薄層色譜法（TLC）通過展開劑遷移分離毒素，酶聯免疫吸附法（ELISA）利用抗原抗體反應定量，但易受基質干擾，靈敏度較低（檢測限約0.1μg/kg）。  

現代技術：  

全自動檢測儀：集成樣品稱量、提取、分離、檢測全流程自動化，每小時處理60個樣品，檢測限達0.01μg/kg（如黃曲霉毒素B1），支持6種毒素同步檢測，數據實時上傳云端。  

液相色譜-質譜聯用（LC-MS/MS）：通過多反應監測（MRM）模式實現高特異性定量，結合同位素內標法（如棒曲霉素-13C7）校正基質效應，檢測限低至0.005μg/kg。  

電化學傳感器：基于便攜式電化學工作站構建適體傳感器，利用催化電流變化定量玉米赤霉烯酮（ZEN），線性范圍0.01ng/mL-100ng/mL，檢測下限0.389pg/mL。  

儀器操作與質量控制  

設備校準與維護：定期校準移液器、離心機、恒溫孵育器（如37℃±0.5℃），確保試劑有效期驗證（如ELISA試劑盒需測試標準曲線斜率）。  

質量控制措施：  

內部質控：隨樣品檢測空白對照、高/中/低濃度標準品，進行加標回收實驗（回收率80%-120%）。  

外部驗證：參與室間質評或實驗室比對，確保結果一致性（如Z-評分≤2）。  

誤差控制：避免過柱流速過快影響回收率，氮吹吹干時需精確控制體積，防止目標物損失。  

結果分析與數據管理  

數據解讀：對比國家標準（如黃曲霉毒素B1限值5μg/kg），超標樣品需復檢并溯源至原料批次。